實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀的意義是什么？我們?cè)撊绾芜x擇實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀？環(huán)球醫(yī)療器械網(wǎng)為您介紹實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)的主要應(yīng)用：

1、DNA 或RNA 的**定量分析：包括病原微生物或病毒含量的檢測(cè),轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)的檢測(cè)，RNAi 基因失活率的檢測(cè)等

2、基因表達(dá)差異分析：例如比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等 )，特定基因在不同時(shí)相的表達(dá)差異以及cDNA 芯片或差顯結(jié)果的確證

3、基因分型：例如SNP 檢測(cè)，甲基化檢測(cè)等。

其中Realtime PCR 常用的兩種方法分別為：Sybr green（熒光染料摻入法）

和Taqman probe （探針法）。

SYBR green法適用于：

1、靈敏度高：使用SYBR可使熒光效果增強(qiáng)到1000倍以上

2、通用性好,不需要設(shè)計(jì)探針,方法簡(jiǎn)便,省時(shí),價(jià)格低廉。

3、通用型方法，在國(guó)內(nèi)外科研中普遍使用。

4、高通量大規(guī)模的定量PCR檢測(cè)

5、專一性要求不高的定量PCR檢測(cè)。

Taqman Probe法適用于：

1、具有高適應(yīng)性和可靠性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定重復(fù)性好，特異性更高。

2、適用于擴(kuò)增序列專一的體系的檢測(cè)。

3、樣品中靶基因含量過低的定量PCR檢測(cè)。

4、靶基因的特異序列較短，無論怎樣優(yōu)化引物設(shè)計(jì)條件都不能解決。

5、存在與靶基因同源的序列，在PCR中容易出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，對(duì)特異性要求較高的定量。

6、廣泛用于人類傳染病的診斷和病原定量,在動(dòng)物病原體基因的檢測(cè),畜禽產(chǎn)品的檢驗(yàn)檢疫,生物制品的鑒定。